LATAM Revista Latinoamericana de Ciencias Sociales y Humanidades, Asunción, Paraguay.
ISSN en línea: 2789-3855, marzo, 2023, Volumen IV, Número 1 p 3444.
DOI: https://doi.org/10.56712/latam.v4i1.498
PCR como técnica molecular más utilizada en el
diagnóstico del virus del dengue. Revisión sistemática
PCR as the most widely used molecular technique in the diagnosis of
dengue virus. Systematic review
Candelario Rodríguez Pérez
DAMJM. Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, México.
potencia_rguez@hotmail.com
https://orcid.org/0000-0002-8233-0577
Villahermosa - México
Santa Dolores Carreño Ruiz
FMEA. Universidad Autónoma de Chiapas, México
lasanta456@hotmail.com
https://orcid.org/0000-0002-5782-193X
Chiapas - México
Mireya Martínez Rodríguez
DAMJM. Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, México
mrmireya25@hotmail.com
https://orcid.org/0000-0003-4894-0969
Villahermosa - México
Rosa Felicita Ortíz Ojeda
DAMJM. Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, México
rosaf_oo@hotmail.com
https://orcid.org/0000-0001-9137-7118
Villahermosa - México
Artículo recibido: día 13 de marzo de 2023. Aceptado para publicación: 16 de marzo de 2023.
Conflictos de Interés: Ninguno que declarar.
Resumen
Los métodos moleculares, pruebas inmunológicas, bioquímicas y de sensores permiten de forma
rápida la detección de agentes microscópicos, estos son útiles como herramientas que ayudan
en el diagnóstico de enfermedades en la identificación del virus del dengue transmitido por el
vector Aedes aegypti. Con el uso de la PCR como técnica molecular se puede amplificar el
material genético ya sea ADN o ARN. El presente trabajo de investigación tiene como propósito
conocer e identificar la principal técnica molecular aplicada como método para el diagnóstico
del virus dengue y así tener un panorama más amplio ante la detección oportuna de este agente
vírico. De forma sistemática se hizo una revisión exhaustiva con el método PRISMA utilizando
diferentes motores de búsqueda como Science Direct, Google Académico y PubMed y en una
base Excel se concentró la información. Se encontró 2,084 artículos relacionados al tema, el
53.8% de ellos se situó en la base Google Académico, Colombia fue el país con mayor número
de estudios realizado en la detección del virus dengue con técnica molecular, como la RT-PCR.
Para la detección del virus dengue se siguen utilizando las pruebas serológicas, sin embargo, la
técnica molecular RT-PCR se utilizó en un 71.4% de los estudios.
Palabras clave: virus, dengue, técnicas moleculares, diagnóstico
LATAM Revista Latinoamericana de Ciencias Sociales y Humanidades, Asunción, Paraguay.
ISSN en línea: 2789-3855, marzo, 2023, Volumen IV, Número 1 p 3445.
Abstract
Molecular methods, immunological, biochemical and sensor tests allow the rapid detection of
microscopic agents, these are useful as tools that help in the diagnosis of diseases in the
identification of the dengue virus transmitted by the Aedes aegypti vector. With the use of PCR
as a molecular technique, genetic material can be amplified, whether it is DNA or RNA. Aim. The
purpose of this research work is to know and identify the main molecular technique applied as a
method for the diagnosis of the dengue virus and thus have a broader panorama before the timely
detection of this viral agent. An exhaustive review was carried out systematically with the PRISMA
method using different search engines such as Science Direct, Google Scholar and PubMed and
the information was concentrated in an Excel database. Results. 2,084 articles related to the
subject were found, 53.8% of them were located in the Google Scholar database, Colombia was
the country with the largest number of studies carried out on the detection of the dengue virus
with a molecular technique, such as RT-PCR. For the detection of the dengue virus, serological
tests continue to be used, however the RT-PCR molecular technique was used in 71.4% of the
studies.
Keywords: virus, dengue, molecular techniques, diagnosis
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Como citar: Rodríguez Pérez, C., Rodríguez Pérez, C., Carreño Ruiz, S. D., Martínez Rodríguez, M.,
Martínez Rodríguez, M., & Ortíz Ojeda, R. F. (2023). PCR como técnica molecular más utilizada
en el diagnóstico del virus del dengue. Revisión sistemática. LATAM Revista Latinoamericana de
Ciencias Sociales y Humanidades 4(1), 3444–3455. https://doi.org/10.56712/latam.v4i1.498
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PCR COMO TÉCNICA MOLECULAR MÁS UTILIZADAS EN EL DIAGNÓSTICO DEL VIRUS DEL
DENGUE. REVISIÓN SISTEMÁTICA
El dengue, es una infección viral que se transmite por la picadura del mosquito del género Aedes
principalmente por la especie aegypti su incidencia representa un problema de salud pública a
nivel mundial.1 representando casi el 50% de la población en riesgo. El virus del dengue (DENV)
es el arbovirosis más importante en términos de morbilidad, mortalidad y afectación
económica.2,3,4 Incluye 5 serotipos denominados DENV1 a DENV5. Este último ha sido descrito
recientemente, produce un espectro de enfermedad que cursa desde una infección asintomática,
un cuadro febril sin complicaciones o una enfermedad grave con incremento en la permeabilidad
vascular, llevando a complicaciones hemorrágicas, e incluso la muerte del individuo.5
El dengue es generado por un virus de ARN del género Flavivirus, familia Flaviviridae. El genoma
viral codifica para una poliproteína que es posteriormente procesada dando lugar a 3 proteínas
estructurales (prM/M, E y C) y 7 no estructurales (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B, NS5).6
La secuenciación del DENV brindó información de su origen, ubicándo en el continente de África
como sitio originario. En relación a los mecanismos de evolución, tal cual sucede con otros virus
de ARN; DENV-1 presenta altas tasas de mutación debido a una ARN polimerasa intrínsecamente
susceptible de errores. Este virus exhibe abundante variación genética, sin que esto dé lugar a la
formación de cuasiespecies.7
De acuerdo a la OMS (Organización Mundial de la Salud) en los últimos años han aumentado los
casos de dengue. En el periodo del 2000 al 2004 el promedio de casos pasó de 479.8489 a
925.896 casos, casi el doble de la cifra de promedio anual del periodo 1990-1999.2,8 En los
primeros cinco meses del año 2020 la Organización Panamericana de Salud (OPS) notificó más
de 1,6 millones de casos de dengue en las Américas. La mayor parte de casos se reportó en
Brasil, con 1.040.481 representando el 65%, Paraguay, con 218.798, Bolivia, con 82.460,
Argentina con 79.775 y Colombia con 54.192 casos. Otros países como Honduras, México y
Nicaragua también reportaron altas tasas de incidencia, y con menores números de casos se
reportaron países de Centroamérica y el Caribe.9
Los casos de infecciones tropicales que incluyen a la malaria, el dengue, la leptospirosis y las
rickettsiosis, se presentan con fiebre, signos y síntomas inespecíficos, para los cuales es
necesario realizar pruebas diagnósticas que van desde los serológicas a moleculares para su
atención.10
En la actualidad se han desarrollado métodos moleculares rápidos que permiten la detección de
agentes microscópicos en un tiempo corto (24-72 h) así como pruebas inmunológicas,
bioquímicas y de biosensores. Útiles como herramientas de detección que reducen la mano de
obra y el tiempo de respuestas.11 El diagnóstico molecular engloba un conjunto de técnicas de
laboratorio que tienen como objetivo principal extraer, identificar y amplificar fragmentos de
material genético, ADN y ARN.
El desarrollo de técnicas moleculares como la secuenciación masiva, ha traído consigo el
desarrollo de estrategias para conocer los genomas presentes en los distintos ambientes, estas
técnicas permiten reconocer la presencia de los virus conocidos y desconocidos.12 Es por ello
que el objetivo principal del presente trabajo es conocer e identificar la principal técnica
molecular aplicada como método para el diagnóstico del virus dengue y así tener un panorama
más amplio ante la detección oportuna de este agente vírico.
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Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Esta técnica tiene como finalidad ampliar en masa fragmentos de determinado ADN, a través de
un termociclador, en una serie de ciclos repetitivos, siguiendo un patrón de temperatura para la
desnaturalización del ADN (94°C), un rango de temperaturas de 45-55°C para que se alineen los
primer (cebadores) agregándole los dNTP´s complementarios y un periodo de extensión
(temperatura de 72° C), que se logra mediante una enzima DNA polimerasa termoestable, para
crear una acumulación de fragmentos específicos13 al final del ciclo se habrán formado el
amplicon con el tamaño dictado por el número total de pares de bases (pb) que deberá fijar el
investigador.11 En los próximos números de copias el producto que se recién sintetizó sirve como
molde para los siguientes ciclos, de esta forma se crea la reacción en cadena a traves de la
polimerasa, permitiendo ampliar el número de fragmentos del ADN. Esta técnica ofrece
sensibilidad y especificidad debido a que en cantidades pequeñas de una muestra y de material
genético detecta la presencia de microorganismos y permite ampliar únicamente el
microorganismo diana con procesamiento rápido.13
Reverso transcripción-PCR
El procedimiento convencional de la PCR ha tenido modificaciones, que ampliaron su capacidad
para el diagnóstico. Uno de ellos es el desarrollo de la Transcripción reversa-PCR, conocida como
RT-PCR (Reverse Transcription-PCR, por sus siglas en inglés). Se desarrolló para ARN dianas,
donde a partir del ARN se obtiene un ADN complementario (ADNc); para la conversión es
necesario la enzima transcriptasa reversa o reverso transcriptasa (una polimerasa de ADN‐ARN
dependiente). En el primer ciclo de la reacción se pueden utilizar como cebador los hexámeros
de oligonucleótidos formados por seis nucleótidos, los cuales se unen al azar en cualquier región
del ARN molde, o un oligonucleótido (en general un oligo dT) que permite la captura y la
realización del ADNc a partir del ARNm o ARN con colas poliA. Al obtener el ADNc se amplifica
con un ADN polimerasa. Las reverso transcriptasas (RTase), usadas comúnmente son la del virus
MMLV de la leucemia murina (Moloney Murine Leukemia Virus, por sus siglas en inglés) y la
reverso transcriptasa AMV del virus de la mieloblastosis aviar. Sin embargo, se han ido
desarrollando más RTases con el uso de la tecnología recombinante.14
Nucleic Acid Test (NAT)
La técnica NAT (Nucleic Acid Amplification Technology, por sus siglas en inglés) fue postulada
desde 1999 a nivel mundial. Permite detectar la presencia de material genético del virus en la
sangre, antes que los ensayos serológicos sean positivos, ya que actúan como marcador de
replicación viral y da la infectividad del mismo por su capacidad de ser considerado un virón; por
otro lado, indican la respuesta del virus ante una terapia con drogas y pueden predecir la
respuesta a tratamiento. La prueba de NAT parte de la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR).15
RT- PCR / ELISA
La serología es la técnica que más se emplea en el diagnóstico de rutina. No es una técnica
molecular, sin embargo, se recomiendan como complemento a las pruebas moleculares, así
como para monitoreo de la enfermedad en lugar de único marcador diagnóstico.16
Los ELISAs (por sus siglas en inglés de Enzyme linked immunosorbent assay) para anticuerpos
IgM e IgG son los estándares para el análisis serológico de las infecciones del virus dengue, ya
que son simples y permiten testar una gran cantidad de muestras, se basa en el uso de una
enzima que reacciona con un sustrato específico, lo cual produce un cambio de color del
cromógeno, evidenciando la formación de inmunocomplejos. Esta técnica permite obtener no
solo un resultado cualitativo, sino semi-cuantitativo.17 Su sensibilidad es del 78% para detectar
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la IgM y del 59% para IgG variando en dependencia del tipo de infección, en la detección
combinada simultánea de ambas inmunoglobulinas la sensibilidad se ve aumentada al 100% en
las infecciones primarias y a 98% en las infecciones secundarias.18,19
MÉTODO
Se realizó una búsqueda de artículos de manera sistemática y exhaustiva utilizando el método
PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses) con el fin de
precisar las técnicas moleculares que están determinadas en las literaturas y que se utilizan para
diagnosticar el virus dengue, en un periodo comprendido del año 2010 al 2022. La identificación
de literatura relevante se llevó a cabo en motores de búsqueda tales como Science Direct, Google
Académico y PubMed, debido a que estas bases de datos contienen información con artículos
publicados de interés.
Las palabras claves que se utilizaron para búsqueda fueron “virus”, “dengue”, “técnicas
moleculares”, “diagnóstico”. Dentro de los filtros que se tomaron en cuenta fue el idioma donde
se trabajó con documentos publicados en el idioma español e inglés, el segundo filtro que se
tomó en cuenta fue la fecha donde solo se tomaron en cuantos artículos publicados entre el
rango de años 2010 al 2021. Se tomaron en cuenta criterios de selección tales como:
Criterios de inclusión:
● Documentos que aporten información sobre el diagnóstico del virus del Dengue.
● Artículos que destacan las técnicas moleculares más implementadas para contrarrestar esta
enfermedad.
● Estudios publicados dentro del periodo de años 2010 al 2021
Criterios de exclusión:
● Artículos cuyo análisis no correspondan a la búsqueda de interés.
● Documentos publicados de fecha anterior al 2010
● Artículos duplicados
Para llevar a cabo la extracción de datos, 3 revisores aplicaron los criterios de exclusión de forma
independiente, asegurando la reproducibilidad, realizando una socialización y discusión de las
dudas. De esta forma se seleccionaron los artículos que integraron el estudio.
Los datos se extrajeron de manera estandarizada siguiendo una metodología sistemática por
medio de hojas de sustracción diseñadas especialmente para esta selección en el formato Excel.
Las propiedades y valores que se consideraron son los próximos:
● Año de publicación
● País
● Datos demográficos
● Tamaño de la muestra
● Prueba utilizada
● Tiempo de detección
● Tipo de muestra
● Serotipo/ antígeno detectado
RESULTADOS
Al realizar la búsqueda se encontró un total de 2,084 artículos relacionados con la investigación
en las tres bases de datos. En PubMed se registró 734, en ScienceDirect 100 y en Google
Académico 1,250 artículos.
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En cada motor de búsqueda se aplicaron los criterios como título, palabras clave, abstract y año
de publicación, obteniendo de esta manera un total de 234 artículos.
Al revisar los documentos se consideraron 38 artículos duplicados los cuales se eliminaron,
quedando 196. De ese total se les aplicó los criterios de inclusión necesarios donde se analizó,
si los estudios tratan de investigaciones para vacunas, revisiones, resúmenes publicados y
estudios virales en animales, para no considerarlos en la muestra, llegando a obtener solo 30
artículos para analizar, sin embargo, 15 artículos no cumplían como un estudio viral con
evaluación de una técnica molecular, por lo que, fueron excluidos quedando finalmente 15
artículos validados para extraer la información. (Figura 1)
De los 15 artículos seleccionados el 13,3% correspondía a PubMed; el 52,8% se encontró en la
base Google Académico, y de la base ScienceDirect se seleccionó el 33.4%. La distribución de
los estudios realizados en los países fue, Colombia con 33.3% seguido de México con el 26.6%,
Lima Perú con el 20% y finalmente España, Paraguay y Puerto Rico con 6.6% de estudios
evaluados.
Se observó que por año hubo un reporte de estudio y solo en los años 2011 y 2016 se encontró
dos estudios por años todos ellos con investigaciones moleculares para el diagnóstico del
dengue.
Figura 1
Flujograma de la selección de los artículos en el estudio
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De los artículos analizados para la extracción de la información en la base de datos se encontró
diferentes pruebas moleculares utilizadas en los estudios; además de la inclusión de pruebas de
antígenos para un diagnóstico más amplio. Las técnicas más utilizadas fueron RT–PCR con un
71.43% y RT–PCR en conjunto con ELISA con el 14.29%, otras técnicas como PCR anidad y NAT
fueron usadas en menor cantidad con 7.14% para ambas técnicas. (Gráfica 1)
Gráfica 1
Principales técnicas moleculares para el diagnóstico del virus dengue
Fuente directa
En la gráfica 2 se muestra los tipos de material biológico que se utilizó en los estudios para llevar
a cabo las técnicas moleculares en la detección de presencia del virus dengue; encontrándose
que el 46.3% de los estudios se basaron de muestras de sangre, el 27% de plasma, el 20 y 6.7%
en suero y tejido respectivamente.
Gráfica 2
Material biológico utilizado en las técnicas moleculares
Fuente directa
71,43
14,29
7,14
7,14
0,00 10,00 20,00 30,00 40,00 50,00 60,00 70,00 80,00
RT - PCR
RT - PCR y ELISA
PCR Anidada
NAT
PORCENTAJE
T
É
C
N
IC
A
S
M
O
L
E
C
U
L
A
R
E
S
4
6
.3
2
0
,0
2
7
6
,7
S A N G R E S U E R O P L A S M A T E J I D O
P
O
R
C
E
N
T
A
JE
MUESTRA BIOLOGÍCA
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En la tabla 1 se observa la variabilidad de posibles blancos moleculares utilizados con las
diferentes técnicas que se emplearon para el diagnóstico del virus dengue dentro de la población
de estudios, en ello se observa que los cuatros serotipos DENV fueron diagnosticado con las
pruebas PCR tanto en RT como la prueba de serología ELISA, ninguno de esos serotipos fue
diagnosticado con NAT. Los blancos moleculares como las inmunoglobulinas G y M, así como
la NS1 fueron por RT-PCR y ELISA.
Tabla 1
Blancos moleculares utilizados y la técnica empleada en cada estudio
BLANCO
MOLECULAR
RT - PCR
RT-PCR
/ELISA
PCR
ANIDADA
NAT
DEN V1 X X X
DEN V2 X X X
DEN V3 X X X
DEN V4 X X
NS1 X
IgG/IgM X
NS1 y
IgG/IgM
X X
Total 5 6 3 1
Fuente directa
DISCUSIÓN
Esta revisión sistemática cobra importancia en la aplicación de las técnicas moleculares como
la RT-PCR con sus distintas variantes para la detección del DENV en sus diferentes serotipos.
Para la vigilancia entomológica son herramientas prácticas que ayudan en el diagnóstico del
virus dengue, transmitido por el vector Aedes y sirven como advertencia en su transmisión viral
durante el inicio.20 En los laboratorios de diagnóstico e investigación la aplicación de las técnicas
moleculares representa un avance en la amplificación de fragmentos genómicos que ayudan en
la identificación de los agentes infecciosos. 21
Se ha considerado a las proteínas NS1 no estructurales como un marcador importante de
diagnóstico en el inicio de la infección por el virus dengue. Se secreta en células infectadas y se
encuentra circulando en niveles altos en la sangre del individuo infectado. En el año 2000, se
describió por primera vez la captura de antígeno a través de la técnica ELISA para la detección
de NS1 en sangre de pacientes .22 En estudios con pruebas de detección de NS1 realizados en
2021 en una población de niños, 75 resultaron positivos y el resto negativo, y en 1 paciente se
obtuvo serología IgM positivo.23
La búsqueda de la IgM por ELISA a nivel mundial ha sido el método de diagnóstico que más se
ha utilizado, pero presenta desventaja en su periodo de ventana de 4 a 6 días. La comparación
de estudios en el uso de NS1 e IgM para diagnosticar el dengue, se han publicado por la
universidad de Quaid-i-Azam en Pakistán, en donde se observó que la sensibilidad del antígeno
NS1 se presenta con mayor tasa, en comparación con IgM ELISA y que la PCR en tiempo real, al
confirmar la infección por dengue en laboratorios.24 Estudios en el 2014, buscaron relación de
casos de dengue, en las fronteras de Estados Unidos y México entre el condado de Yuma y
Sonora, encontraron un total de 52 casos confirmados, donde se detectó el 58% con NS1, 40%
por detección de DENV IgM, y por NS1 y RT-PCR solo el 2% de los casos, del total de la población
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el 62% fueron mujeres.25 En esta investigación se encontró dos estudios que analizaron la
relación del NS1 y IgG/IgM con dos diferentes técnicas. La combinación de NS1 con ELISA para
la detección de anticuerpos IgM en muestras de suero en los primeros siete días de la
enfermedad permite en el 95% de los casos determinar con precisión la enfermedad.26
Por otro lado, de acuerdo a criterios internacionales se han realizado diagnóstico en recién
nacidos en base a serología (ELISA-IgM e IgG), cultivo viral y técnicas moleculares (RT-PCR).
Watanaveeradej y cols., estudiaron los anticuerpos del dengue en la transmisión vertical de 250
duplas madre-niño y observaron que los anticuerpos de las madres seropositivas pasaron a sus
niños.27 Estudios en 2020, sobre seroprevalencia del dengue, con la aplicación de pruebas ELISA
ligado a enzimas para dengue indirecta IgG, se encontró en un 91.36%. La seroprevalencia con
prueba de captura para IgM fue de 21.41% y de un 20.3% la seropositividad conjunta de los
anticuerpos IgM e IgG.28
Para el diagnóstico enfermedades tropicales en laboratorios y algunos centros de investigación
se trabajan con muestras de sangre para la PCR 10 como otros métodos de detección y
aislamiento del ARN viral, dentro de ello está el RT-PCR con sensibilidad entre el 80-90% y
especificidad por arriba del 95% durante los 3 primeros días de la enfermedad.29
Mishra y cols., en 2022, sometieron su estudio a la detención del ARN viral mediante RT-PCR
convencional y el serotipo de dengue se identificó mediante PCR múltiplex un solo tubo que
resultó positivo en PCR convencional; sometieron 13 muestras de las 39 que fueron positivas
para NS1, donde el 75% se detectó ARN viral de dengue y se aisló un serotipo de DENV-3.8 otros
estudios con muestras en tejido hepático mediante RT-PCR confirmaron la infección del serotipo
DENV2. 30
CONCLUSIÓN
En esta revisión se encontró que las pruebas serológicas se singuen utilizando en la detección
de la infección por el virus dengue, esto debido a su bajo costo y la simplicidad con la que se
opera. Sin embargo, en los centros de investigación y laboratorios privados las técnicas
moleculares facilitan la detección y diagnóstico oportuno de la enfermedad. La RT–PCR es la
técnica molecular que más se utiliza en los estudios de detección del virus en cualquiera de sus
serotipos circulantes. Cabe destacar que las ventajas que representa la RT – PCR son el hecho
que cuenta con una alta sensibilidad, así como también su alta especificidad, otra de sus ventajas
es que se requiere de pocas muestras para su aplicación, así como la optimización y rapidez. Por
otro lado, se observó que en los países donde se estudiaron la detección del virus, las pruebas
moleculares no difieren entre ellos.
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ISSN en línea: 2789-3855, marzo, 2023, Volumen IV, Número 1 p 3453.
REFERENCIAS
Berberian, Griselda, Fariña, Diana, Rosanova, María Teresa, Hidalgo, Solange, Enría, Delia,
Mitchenko, Alicia, Moreno, Julio, & Sánchez Soto, Isabel. (2011). Dengue perinatal. Archivos
argentinos de pediatría, 109(3), 232-236. Recuperado en 07 de marzo de 2023, de
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-
00752011000300008&lng=es&tlng=es. DOI: 10.1590/S0325-00752011000300008
Bernal Vega, Erica Eliana, Iramain Chilavert, Ricardo, Jara Ávalos, Alfredo Ramón, Delvalle Acosta,
Edith María Rossana, Arzamendia Alarcón, Laura Patricia, & Román Almada, Landhy Elizabeth.
(2021). Caracterización clínica y laboratorial de pacientes pediátricos con dengue sin signos de
alarma en un hospital de referencia de Paraguay. Pediatría (Asunción), 48(2), 127-132. Epub
August 00, 2021. https://doi.org/10.31698/ped.48022021007
Blacksell, SD, Bell, D., Kelley, J., Mammen, MP, Jr, Gibbons, RV, Jarman, RG, Vaughn, DW,
Jenjaroen, K., Nisalak, A., Thongpaseuth, S., Vongsouvath, M ., Davong, V., Phouminh, P.,
Phetsouvanh, R., Day, NPJ y Newton, PN (2007). Estudio prospectivo para determinar la precisión
de los ensayos serológicos rápidos para el diagnóstico de la infección aguda por el virus del
dengue en Laos. Inmunología clínica y de vacunas: CVI , 14 (11), 1458–1464.
https://doi.org/10.1128/CVI.00482-06
Camacho, Daría, Reyes, Jesús, Franco, Leticia, Comach, Guillermo, & Ferrer, Elizabeth. (2016).
Clonación de secuencias de alfavirus y flavivirus para su uso como controles positivos en el
diagnóstico molecular. Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Publica, 33(2), 269-
273. https://dx.doi.org/10.17843/rpmesp.2016.332.2101
Castañeda-Ruelas, Gloria Marisol, Guzmán-Uriarte, José Roberto, Valdez-Torres, José Benigno, &
León-Félix, Josefina. (2022). Evaluación de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real
acoplado a separación inmunomagnética (PCRTR-IMS) como método alternativo para la
detección rutinaria de Salmonella spp. en carne de res en México. Revista mexicana de ciencias
pecuarias, 13(3), 625-642. Epub 22 de agosto de 2022.
https://doi.org/10.22319/rmcp.v13i3.5997
Dávila, Sonia & Castelán, Hugo & Perez-Rueda, Ernesto. (2019). Virus por todos lados.
DOI: 10.13140/RG.2.2.27644.36482
Dehesa LE, Gutiérrez AAFA. (2019). Dengue: actualidades y características epidemiológicas en
México. Rev Med UAS;9(3):159-170. http://dx.doi.org/10.28960/revmeduas.2007-
8013.v9.n3.006
Goncalvez, A. P., Escalante, A. A., Pujol, F. H., Ludert, J. E., Tovar, D., Salas, R. A., & Liprandi, F.
(2002). Diversity and evolution of the envelope gene of dengue virus type 1. Virology, 303(1), 110-
119. https://doi.org/10.1006/viro.2002.1686
González-Díez, R. (2004). VIII. NAT y seguridad de la transfusión sanguínea, 140
(3).Medigraphic.com. https://www.medigraphic.com/pdfs/gaceta/gm-2004/gms043ab.pdf
Guzman, M. G., Halstead, S. B., Artsob, H., Buchy, P., Farrar, J., Gubler, D. J., Hunsperger, E.,
Kroeger, A., Margolis, H. S., Martínez, E., Nathan, M. B., Pelegrino, J. L., Simmons, C., Yoksan, S.,
& Peeling, R. W. (2010). Dengue: a continuing global threat. Nature Reviews. Microbiology, 8(12
Suppl), S7-16. https://doi.org/10.1038/nrmicro2460
Guzmán, MG, & Kourí, G. (2004). Diagnóstico del dengue, avances y desafíos. Revista
Internacional de Enfermedades Infecciosas: IJID: Publicación Oficial de la Sociedad Internacional
de Enfermedades Infecciosas, 8(2), 69–80. https://doi.org/10.1016/j.ijid.2003.03.003
LATAM Revista Latinoamericana de Ciencias Sociales y Humanidades, Asunción, Paraguay.
ISSN en línea: 2789-3855, marzo, 2023, Volumen IV, Número 1 p 3454.
Holmes, CE (2006). La biología evolutiva del virus del dengue. Simposio de la Fundación
Novartis , 277 , 177–187; discusión 187-92, 251-253. https://doi.org/10.1002/0470058005.ch13
Hunsperger, E. A. et al. (2016), “Performance of Dengue Diagnostic Tests in a Single-Specimen
Diagnostic Algorithm”, J Infect Dis, 214(6):836-844. doi: 10.1093/ infdis/jiw103
Jun, 23. (n.d.). Casos de dengue superan los 1,6 millones en América, lo que pone de relieve la
necesidad del control de mosquitos durante la pandemia. Paho.org. Retrieved March 6, 2023,
from https://www.paho.org/es/noticias/23-6-2020-casos-dengue-superan-16-millones-america-
lo-que-pone-relieve-necesidad-control
Kindhauser, MK y Organización Mundial de la Salud. (2003). Enfermedades transmisibles 2002:
defensa mundial contra la amenaza de las enfermedades infecciosas: Dengue y fiebre
hemorrágica / editado por Mary Kay Kindhauser, 140 (3), Organización Mundial de la Salud. ISBN:
99241590297 Versión digital disponible: http://www.minsa.gob.pe/bvsminsa.asp
Ma, H., Shieh, K.-J., & Lee, S.-L. (2006). Study of ELISA technique. Nature and Science 4 (2). 36-
37. Sciencepub.net. http://sciencepub.net/nature/0402/08-0137-mahongbao.pdf
Medeiros, A. S., Costa, D. M. P., Branco, M. S. D., Sousa, D. M. C., Monteiro, J. D., Galvão, S. P. M.,
Azevedo, P. R. M., Fernandes, J. V., Jeronimo, S. M. B., & Araújo, J. M. G. (2018). Dengue virus in
Aedes aegypti and Aedes albopictus in urban areas in the state of Rio Grande do Norte, Brazil:
Importance of virological and entomological surveillance. PloS one, 13(3), e0194108.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0194108
Mishra, M., Yadav, S.K., Mishra, S.K., & Ratho, R.K. (2022). Molecular detection and
characterization of dengue isolates circulating in north India. Iranian Journal of Microbiology, 14,
104 - 111. https://doi.org/10.18502/ijm.v14i1.8811
Molineros Gallón, Luis Fernando, Pinzón Gómez, Elisa María, Rengifo García, Nubia Esperanza,
Daza Rivera, Carlos Frisherald, Hernández-Carrillo, Mauricio, Ortiz Carrillo, María Eugenia, &
Lesmes Duque, María Cristina. (2020). Seroprevalencia de dengue en municipios con transmisión
hiperendémica y mesoendémica, Valle del Cauca, Colombia. Revista Cubana de Salud Pública,
46(2), e1256. Epub 01 de junio de 2020. Recuperado en 07 de marzo de 2023, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-
34662020000200008&lng=es&tlng=es.
Muller, D. A., Depelsenaire, A. C., & Young, P. R. (2017). Clinical and Laboratory Diagnosis of
Dengue Virus Infection. The Journal of infectious diseases, 215(suppl_2), S89–S95.
https://doi.org/10.1093/infdis/jiw649
Perera, Carmen Laura, & Acevedo, Ana María. (2018). Nuevas tendencias en el diagnóstico de
enfermedades virales en los animales. Revista de Salud Animal, 40(3), e02. Recuperado en 12 de
marzo de 2023, de
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0253570X2018000300007&lng=es&tlng
=es
Rivera, Jorge & Neira, Marcela & Parra, Edgar & Méndez, Jairo & Sarmiento, Ladys & Caldas, Maria.
(2014). Detección de antígenos del virus dengue en tejidos post mortem. Biomédica. 34.
10.7705/biomedica.v34i4.2169. DOI: https://doi.org/10.7705/biomedica.v34i4.2169
Rodríguez, P. H. (2003). Técnicas moleculares: Un avance en el diagnóstico y conocimiento de
patología oculares. Ciencia y tecnología para la salud visual y ocular, 1(1), 113–123.
https://doi.org/10.19052/issn.1692-8415
LATAM Revista Latinoamericana de Ciencias Sociales y Humanidades, Asunción, Paraguay.
ISSN en línea: 2789-3855, marzo, 2023, Volumen IV, Número 1 p 3455.
Rodríguez-Salazar, CA, Recalde-Reyes, DP, González, MM, Padilla Sanabria, L., Quintero-Álvarez,
L., Gallego-Gómez, JC, & Castaño-Osorio, JC (2016). Manifestaciones clínicas y pruebas de
laboratorio de una serie de casos febriles agudos con diagnóstico presuntivo de infección por el
virus del dengue. Quindío (Colombia). Infectio: revista de la Asociación Colombiana de
Infectología , 20 (2), 84–92. https://doi.org/10.1016/j.infect.2015.08.003
Suleman M, Faryal R, Alam MM, Sharif S, Shaukat S, Aamir UB, et al. (2016) NS1 antigen: A new
beam of light in the early diagnosis of dengue infection. Asian Pac J Trop Med;9(12):1212- 1214
Urgilés Esquivel, J., & Ortiz, J. G. (2021). Métodos diagnósticos de la boratório para coronavirus
2019 n-cov. Revista Vive, 4(10), 107–127. https://doi.org/10.33996/revistavive.v4i10.80
Vaughn, D. W., Nisalak, A., Solomon, T., Kalayanarooj, S., Nguyen, M. D., Kneen, R., Cuzzubbo, A.,
& Devine, P. L. (1999). Rapid serologic diagnosis of dengue virus infection using a commercial
capture ELISA that distinguishes primary and secondary infections. The American Journal of
Tropical Medicine and Hygiene, 60(4), 693–698. https://doi.org/10.4269/ajtmh.1999.60.693
Villamil-Gómez, W. (2022). Diagnostic protocol for febrile syndrome of respiratory origin in
geographical areas of endemic risk of tropical infections. Medicine, 13(58),3432–3437.
https://doi.org/10.1016/j.med.2022.05.033
Watanaveeradej, V., Endy, T. P., Samakoses, R., Kerdpanich, A., Simasathien, S., Polprasert, N.,
Aree, C., Vaughn, D. W., Ho, C., & Nisalak, A. (2003). Transplacentally transferred maternal-infant
antibodies to dengue virus. The American journal of tropical medicine and hygiene, 69(2), 123–
128.
Wilder-Smith, A., & Rupali, P. (2019). Estimating the dengue burden in India. The Lancet. Global
Health, 7(8), e988–e989. https://doi.org/10.1016/S2214-109X(19)30249-9
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